Маршрут автобуса №27 пролягає через основні зупинки: Троєщина, вул. Драйзера, вул. Милославська, Деснянська площа, вул. Олени Теліги, Чернігівська, вул. Лисківська, Лісова та інші вузлові точки міста. Повний перелік зупинок по порядку: Троєщина → вул. Драйзера → вул. Милославська → Деснянська площа → вул. Олени Теліги → Чернігівська → вул. Лисківська → Лісова → вул. Чернігівська (Схід) → Дарниця → вул. Братиславська → Бортничі → вул. Харківська (Пд) → Позняки → вул. Академіка Заболотного → Академмістечко → вул. Симиренка → Борщагівська.

Маршрут має зручні пересадки на метро: Чернігівська, Лісова, Дарниця, Академмістечко. Час роботи автобуса №27: 05:30–23:00. Інтервал руху в години пік — 12 хвилин, в інший час — 18 хвилин.

Вартість проїзду в автобусі №27 відповідає єдиному тарифу міського транспорту Києва — 8 грн. Оплатити проїзд можна готівкою водієві або за допомогою безконтактної картки «Київ» (Kyiv Smart Card). Картка «Київ» приймається на всіх маршрутах міського транспорту та є найзручнішим способом оплати.

Актуальний розклад руху автобуса №27 та відстеження транспорту в режимі реального часу доступні в застосунках Kyiv Smart City та Moovit. У Google Maps можна побудувати маршрут з урахуванням пересадок на метро, автобуси та тролейбуси.

Маршрут автобуса №27 має важливе значення для мобільності мешканців районів Деснянський, Дарницький, Святошинський. Він забезпечує зручне сполучення між спальними районами та центральними вулицями міста, а також під'їзд до станцій метро.

Для зручності пасажирів на зупинках маршруту автобуса №27 розміщені розклади руху. Під час пікового навантаження (ранок 07:00–09:30, вечір 16:30–19:30) рекомендується враховувати можливі затримки через інтенсивний трафік.

Маршрут обслуговується Київпасстрансом — комунальним підприємством, що відповідає за наземний громадський транспорт столиці. Парк транспортних засобів регулярно оновлюється сучасними автобусами та тролейбусами з кондиціонуванням та системою оголошення зупинок.